Análisis de la expresión del gen fitoeno sintasa psy en la biosíntesis de carotenoides en Dunaliella sp. expuesta a condiciones de estrés mediante RT-PCR semicuantitativa

Abstract

El mecanismo regulador de carotenoides en Dunaliella sp. es poco comprendido, se sabe que el gen psy es el responsable de activar la ruta metabólica de los carotenoides. En este estudio se comparó la expresión del gen psy en la biosíntesis de carotenoides en cultivos vegetativos y sometidos a estrés de Dunaliella sp. (aislado PM018) mediante RT-PCR semicuantitativa. Para ello, el aislado se cultivó en medio Guillard F/2 y fue sometido a 200 μmol fotones m⁻² s⁻¹ con privación de nutrientes durante 24 días, y se analizó la expresión relativa del gen inducido por RT-PCR semicuantitativa mediante densitometría normalizada con el gen 18S ARNr. Los resultados revelaron que el cultivo vegetativo alcanzó una densidad de 19 x 105 células/mL, observándose cambios morfológicos (de ovoide a redonda) y de coloración (de verde a amarillo) tras la fase de estrés. Previo a los niveles de expresión, se verificó la calidad de ARN, obteniendo una concentración de 454.65 ± 279.02 ng/μL en crecimiento vegetativo y 989 ± 191.73 ng/μL en estrés. Finalmente, en la fase vegetativa se obtuvo una expresión relativa del gen psy de 0.16 ± 0.002 y una mayor expresión de 2.72 ± 0.001 en condiciones de estrés. Se concluye que la transcripción del gen psy está influenciada por la combinación de los factores estresantes, y que la técnica RT-PCR semicuantitativa, permitió detectar una alta sensibilidad en la transcripción de ARNm.